凱氏定氮儀對刺槐花蛋白質等營養元素的測定
來源： http://www.www-bb182.com/ 類別：實用技術 更新時間：2015-03-31 閱讀次
刺槐的嫩葉花在現代營養角度來說含有豐富的蛋白質、糖。和氨基酸、酶及多種微量元素。不再僅僅只有單純的要用價值了。擁有這么多的營養價值，已然被放上了人們的餐桌了。因為蛋白質是人體三大營養素之一，是一切生命的物質基礎，是構成人體新生組織、維持人體健康的重要成分。那么，刺槐花的蛋白質含量如何檢測呢？主要的檢測儀器當然還是凱氏定氮儀。
凱氏定氮儀測定蛋白質的主要原理是，蛋白質是含氮的有機化合物。刺槐花中含氮的有機化合物與硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后再以鹽酸標準溶液滴定，酸的消耗量乘以換算系數，即為蛋白質含量。
凱氏定氮儀具體的操作細節如下：
精密稱取樣品2.0g于500mL干燥的凱氏定氮瓶中，加入硫酸鉀6.0g、硫酸銅0.2g以及濃硫酸20mL，稍搖勻后于瓶口放一小漏斗，將瓶以45°角斜支于有小孔的石棉網上，小火加熱，待內容物全部炭化，泡沫完全停止后，加大火力，并保持瓶內液體微沸。隨時轉動燒瓶，使瓶壁上的內容物全部流入消化液中，至液體呈藍綠色澄清透明后，再繼續加熱約40min，取下放冷，加入20mL蒸餾水，移入100mL容量瓶中，用蒸餾水洗滌定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水定容至刻度，搖勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸鉀、硫酸銅、濃硫酸按同一方法做空白對照試驗。
裝好定氮蒸餾裝置，于水蒸氣發生瓶內裝水約2/3處，加甲基紅指示劑數滴及數毫升硫酸，以保持水呈酸性，再加入數粒玻璃珠以防暴沸，加熱煮沸水蒸氣發生瓶內的水。量取2％硼酸吸收液10mL置150mL的錐形瓶內，滴加混合指示液3~5滴，并使冷凝管下端插入液面下，吸取10.0mL樣品消化液由小玻璃杯流入凱氏蒸餾器內，并以10mL水洗滌小玻璃杯，使流入反應器內，塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。再將10mL40%氫氧化鈉溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其緩慢流入反應室，立即將玻璃蓋塞緊，并加水于小玻璃杯以防漏氣。夾緊夾子，開始蒸餾，蒸氣通入反應室使氨通過冷凝管進入接收瓶內。從第一滴蒸餾液滴下起計時，蒸餾5min后，移動接收瓶，使冷凝管下端離開液面再蒸餾1min，使氨全部蒸出，可用精密pH試紙測冷凝管口的冷凝液來測定蒸餾是否完畢，中性則說明已蒸餾完全。然后用少量水沖洗冷凝管下端外部，取下接收瓶。同時吸取10.0mL試劑空白消化液按上述方法操作。
通過凱氏定氮儀對刺槐花蛋白質含量的檢測，更讓我們對刺槐花的營養價值得到進一步的驗證，也不在有任何不信任的感覺。
凱氏定氮儀測定蛋白質的主要原理是，蛋白質是含氮的有機化合物。刺槐花中含氮的有機化合物與硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后再以鹽酸標準溶液滴定，酸的消耗量乘以換算系數，即為蛋白質含量。
凱氏定氮儀具體的操作細節如下：
精密稱取樣品2.0g于500mL干燥的凱氏定氮瓶中，加入硫酸鉀6.0g、硫酸銅0.2g以及濃硫酸20mL，稍搖勻后于瓶口放一小漏斗，將瓶以45°角斜支于有小孔的石棉網上，小火加熱，待內容物全部炭化，泡沫完全停止后，加大火力，并保持瓶內液體微沸。隨時轉動燒瓶，使瓶壁上的內容物全部流入消化液中，至液體呈藍綠色澄清透明后，再繼續加熱約40min，取下放冷，加入20mL蒸餾水，移入100mL容量瓶中，用蒸餾水洗滌定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水定容至刻度，搖勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸鉀、硫酸銅、濃硫酸按同一方法做空白對照試驗。
裝好定氮蒸餾裝置，于水蒸氣發生瓶內裝水約2/3處，加甲基紅指示劑數滴及數毫升硫酸，以保持水呈酸性，再加入數粒玻璃珠以防暴沸，加熱煮沸水蒸氣發生瓶內的水。量取2％硼酸吸收液10mL置150mL的錐形瓶內，滴加混合指示液3~5滴，并使冷凝管下端插入液面下，吸取10.0mL樣品消化液由小玻璃杯流入凱氏蒸餾器內，并以10mL水洗滌小玻璃杯，使流入反應器內，塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。再將10mL40%氫氧化鈉溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其緩慢流入反應室，立即將玻璃蓋塞緊，并加水于小玻璃杯以防漏氣。夾緊夾子，開始蒸餾，蒸氣通入反應室使氨通過冷凝管進入接收瓶內。從第一滴蒸餾液滴下起計時，蒸餾5min后，移動接收瓶，使冷凝管下端離開液面再蒸餾1min，使氨全部蒸出，可用精密pH試紙測冷凝管口的冷凝液來測定蒸餾是否完畢，中性則說明已蒸餾完全。然后用少量水沖洗冷凝管下端外部，取下接收瓶。同時吸取10.0mL試劑空白消化液按上述方法操作。
通過凱氏定氮儀對刺槐花蛋白質含量的檢測，更讓我們對刺槐花的營養價值得到進一步的驗證，也不在有任何不信任的感覺。
